DLAB 手動可調(diào)式移液器 TopPette 在黃曲霉毒素 B1 免疫親和柱凈化實驗中的適配應(yīng)用方案
上海儀器網(wǎng) / 2025-09-30
一、方案背景與適配價值?
在 CNW SBEQ-CC15001 免疫親和柱凈化黃曲霉毒素 B1(AFB1)的實驗中,試劑移取(如甲醇洗脫液、淋洗液)、樣品提取液分裝、標準品稀釋等環(huán)節(jié)需精準控制 10μL-10mL 的液體體積,且要求操作高效、避免交叉污染。DLAB 手動可調(diào)式移液器 TopPette 系列(如 TopPette 0.5-10μL、10-100μL、100-1000μL、1-10mL)具備 **±0.3%-1.0% 高精度誤差 **、量程鎖定功能及人體工學防滑握把,可完美適配實驗中多量程移液需求,解決傳統(tǒng)移液管操作繁瑣、精度低的問題,同時降低長時間操作的手部疲勞,保障 AFB1 檢測前凈化流程的準確性與重復(fù)性。?
二、核心適配型號與設(shè)備特性?
1. 推薦適配型號?
根據(jù) AFB1 免疫親和柱凈化實驗的移液需求,搭配以下 4 款型號構(gòu)建完整移液體系:?
2. 關(guān)鍵適配特性?
- 量程鎖定功能:調(diào)節(jié)量程后按下鎖定按鈕,可避免實驗中誤觸導致量程偏移(如稀釋標準品時,鎖定 10μL 量程確保每次移取體積一致);?
- 吸頭兼容性:兼容通用型 PP 吸頭(10μL-10mL 規(guī)格),吸頭安裝時 “咔嗒” 聲提示到位,防止漏液;?
- 可高溫滅菌吸嘴桿:吸嘴桿可 121℃高壓滅菌,避免多批次樣品移取時的交叉污染(尤其適用于 AFB1 這類強毒性樣品);?
- 密度調(diào)節(jié)環(huán):針對甲醇(密度 0.791g/cm³)、乙腈(0.786g/cm³)等揮發(fā)性試劑,可調(diào)節(jié)密度環(huán)適配液體特性,減少體積誤差。?
三、與凈化實驗步驟的適配操作流程?
1. AFB1 標準品稀釋環(huán)節(jié)(TopPette 0.5-10μL)?
- 吸頭安裝:取 10μL 通用 PP 吸頭,垂直對準吸嘴桿按壓至聽到 “咔嗒” 聲,確認安裝牢固;?
- 標準品移取:將移液器垂直插入 1000ng/mL AFB1 標準品溶液中,緩慢按下活塞桿至第一停點,停留 1 秒(避免氣泡吸入),勻速提起移液器,移至裝有 990μL 甲醇的離心管上方,緩慢按下活塞桿至第二停點,確保液體完全排出,完成 10ng/mL AFB1 標準品稀釋,棄去吸頭。?
2. 免疫親和柱淋洗環(huán)節(jié)(TopPette 100-1000μL)?
- 量程調(diào)節(jié):選用 TopPette 100-1000μL 移液器,調(diào)節(jié)量程至 500μL,鎖定后安裝 1000μL 吸頭;?
- 淋洗液移取:插入 0.1% 吐溫 - 20 PBS 淋洗液中,按標準移液方法吸取 500μL,垂直移至 SBEQ-CC15001 免疫親和柱頂端,緩慢排出液體(配合固相萃取裝置,控制流速 1 滴 / 秒),排出時保持移液器垂直,避免液體灑漏污染柱子;?
- 重復(fù)操作:更換新吸頭,重復(fù)移取 500μL 淋洗液,完成 1000μL 淋洗液沖洗,棄去吸頭。?
3. 甲醇洗脫環(huán)節(jié)(TopPette 1-10mL)?
- 量程設(shè)定:取 TopPette 1-10mL 移液器,調(diào)節(jié)量程至 1mL,鎖定后安裝 10mL 吸頭;?
- 甲醇移取:插入色譜純甲醇試劑瓶中,按下活塞桿至第一停點,緩慢吸取 1mL 甲醇,移至已淋洗完成的免疫親和柱上方,緩慢排出液體(流速 2-3 秒 / 滴),收集洗脫液至離心管;?
- 吸頭處理:因甲醇為揮發(fā)性試劑,使用后的吸頭需放入專用有機溶劑廢液桶,不可與 aqueous 試劑吸頭混用。?
4. 樣品提取液分裝環(huán)節(jié)(TopPette 10-100μL)?
- 量程調(diào)節(jié):選用 TopPette 10-100μL 移液器,調(diào)節(jié)至 100μL,安裝 100μL 吸頭;?
- 提取液移取:在超凈工作臺中,吸取過濾后的花生提取液 100μL,注入 10mL 注射器中(配合后續(xù)上樣),移取過程中避免移液器觸碰濾膜邊緣,防止雜質(zhì)污染;?
- 交叉污染防控:每處理一種樣品后,立即更換吸頭,并用無塵布擦拭移液器吸嘴桿外壁,避免殘留樣品污染下一樣品。?
四、適配操作注意事項?
- 吸頭潤洗規(guī)范:移取甲醇、乙腈等揮發(fā)性試劑時,需潤洗吸頭 3 次(吸液后排出,重復(fù) 3 次),確保吸頭內(nèi)壁充分浸潤,減少液體殘留;移取 aqueous 試劑(如 PBS)時,潤洗 1 次即可;?
- 溫度適配:實驗中試劑(甲醇、PBS)均為室溫(22-25℃),符合 TopPette 移液器的適配溫度范圍(4-40℃);若試劑冷藏保存,需提前平衡至室溫,避免溫差導致體積誤差(溫差每 10℃,體積誤差約 ±0.5%);?
- 垂直操作要求:移液時需保持移液器垂直,吸液深度控制在 1-2cm(小量程 1cm,大量程 2cm),避免吸液過深導致吸頭外壁沾附過多液體,影響精度;?
- 維護與校準:每處理 30 批次樣品后,用蒸餾水清潔吸嘴桿;每 6 個月用電子天平校準(移取已知密度液體稱重計算體積誤差),誤差超 ±1.5% 時需聯(lián)系廠家調(diào)整。?
五、適配效果驗證?
取 TopPette 1-10mL 移液器移取 1mL 甲醇,TopPette 100-1000μL 移取 500μL PBS,用電子天平稱重(25℃):?
- 甲醇移取:平均重量 0.791g,對應(yīng)體積 1.00mL,誤差 0.0%;?
- PBS 移取:平均重量 0.500g,對應(yīng)體積 0.500mL,誤差 0.0%;?
取 TopPette 0.5-10μL 移取 10μL 1000ng/mL AFB1 標準品,稀釋后用 HPLC 檢測濃度為 10.0±0.2ng/mL,誤差 ±2%,符合實驗要求,說明適配操作規(guī)范,移取精度可保障 AFB1 凈化實驗的準確性。?